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对不同介质中弧菌的杀灭效果研究,选用飘浮弧菌、副溶血弧菌和溶藻弧菌 3 种弧菌作为实验材料,研究了臭氧对不同介质中弧菌的杀灭效果。结果表明,将臭氧浓度为 0. 27 mg / L 的臭氧化海水加入到不同介质中杀菌效果差异显著,在纯海水中4 ~ 6 min 即可达到l00% 的杀灭率;在可溶性淀粉(SS)浓度为40 mg / L 的海水中需 要 l0 min 才能达到 l00% 的杀灭率;在牛血清蛋白(BSA)浓度为 40 mg / L 的海水中,l2 min 后杀灭率 仅为 90. 69% ~ 94. 07% 。在海水中加入淀粉和牛血清蛋白,臭氧的杀菌效果下降,二者比较牛血清蛋白对臭氧杀菌效果的影响明显大于淀粉。
臭氧作为消毒杀菌剂已广泛应用于污水处理、饮用水消毒、食品加工、医疗卫生等方面。20 世纪70 年代以来,臭氧技术开始应用于水产养殖臭氧发生器的水处理系统,起到了消毒杀菌、净化水质、减少病害和增加产量的作用。我国近几年开始在水产养殖中应用臭氧发生器水处理技术,在河蟹育苗、单胞藻培育和卤虫卵孵化中应用臭氧水体处理取得良好效果。臭氧具有明显改善水质的作用。孙广明等 (2000)报道了臭氧对海胆、河蟹育苗用水的杀菌效果和对浮游生物的杀灭作用。但有关臭氧在海水中对水生生物主要致病弧菌的杀灭效果未见系统报道,作者根据养殖水环境和臭氧在其中发生反应的复杂性,通过在海水中加入有机物来模拟养殖环境,研究臭氧在不同介质中对弧菌的杀灭效果,为臭氧应用于水产养殖病害防治提供技术支持。
材料和方法 :试验材料
(1)渔水器(臭氧发生器) 产臭氧量 12 ~ 15 g / h,采用 D. B. I 溶解方式,
(2)臭氧浓度自动分析仪 942-094 型,美国 HACH 公司产品。
(3)海水 取自中国水产科学研究院黄海水产研究所小麦岛实验基地的砂滤海水,盐度 32,pH7. 9。
(4)试剂和溶液 牛血清蛋白(BSA)、可溶性淀粉(SS)、Na2 S203均为分析纯。分别配制成 400 mg / L 的牛 血清蛋白(BSA)、400 mg / L 的可溶性淀粉(SS)和 10 mg / L Na2 S203溶液,121 C灭菌 20 min 备用。
(5)试验菌株 飘浮弧菌(Vibrio natriegens)、副溶血弧菌(V. parahaemolyticus)取自青岛海洋大学,溶藻弧 菌(V. alginolyticus)购自中国科学院微生物研究所。将上述菌株接种于 2216E 固体试管斜面培养,24 h后用接 种针挑取菌苔于灭菌试管中,加入 0. 85% 的无菌生理盐水稀释,最后将菌液稀释至 106CFU/ ml 备用。
试验方法
1. 2. 1 臭氧化海水的制备 在 70 L 圆桶中加入 50 L 海水,将渔水器(臭氧发生器)水泵进水口和出水口通入上述圆桶海水中制备臭 氧海水,用 942-094 型臭氧浓度自动分析仪测定臭氧浓度,然后迅速将此臭氧海水加入相应的烧杯或试管内。
1. 2. 2 臭氧衰减的测定 在盛有 10 ml 海水、10 ml 淀粉溶液(400 mg / L)、10 ml 牛血清蛋白溶液(400 mg / L)的烧杯中各自迅速加 入臭氧化海水 90 ml,混匀立即测定臭氧浓度,以后每隔 4 min 测定 1 次。
1. 2. 3 臭氧对弧菌的杀灭效果实验 取灭菌海水、牛血清蛋白溶液(400 mg / L)、淀粉溶液(400 mg / L)各 1. 00 ml,分别加到无菌试管中,然后取 0. 10 ml 106 CFU/ ml 浓度的菌液加到上述介质中混匀,最后分别加入臭氧化海水各 9. 00 ml 混匀。
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